A série Sobrenatural (Supernatural) começa no episódio 1 apresentando a tragédia que transformou os irmãos Sam e Dean Winchester em caçadores de criaturas sobrenaturais. Vinte e dois anos depois da morte misteriosa de sua mãe, os irmãos se reencontram quando o pai, John Winchester, desaparece durante uma investigação.
A morte de Mary Winchester
Em 1983, em Lawrence, no Kansas, o pequeno Sam Winchester chora em seu quarto durante a madrugada. Sua mãe, Mary, vai verificar o que está acontecendo e percebe uma presença estranha próxima ao berço. Pouco depois, ela é encontrada presa ao teto por uma força sobrenatural.
John Winchester presencia o corpo da esposa sendo consumido pelas chamas e entrega Sam ao filho mais velho, Dean, ordenando que ele tire o bebê de casa. A tragédia marca definitivamente a família e dá início à busca de John pela criatura responsável pela morte de Mary.
Sam Winchester tenta levar uma vida normal
Anos depois, Sam está na Universidade Stanford, na Califórnia, onde tenta construir uma vida distante do passado familiar. Ele namora Jessica Moore e se prepara para uma entrevista para a faculdade de Direito.
Durante uma festa de Halloween, porém, Dean aparece inesperadamente. Os irmãos não se veem há dois anos, mas Dean precisa da ajuda de Sam para encontrar o pai, que desapareceu depois de partir em uma de suas investigações.
Sam inicialmente se recusa a voltar para a vida de caçador, mas muda de ideia ao descobrir que John deixou uma mensagem misteriosa. Nela, o pai afirma que algo perigoso está prestes a acontecer. Dean também mostra ao irmão uma série de desaparecimentos relacionados à Centennial Highway.
Supernatural apresenta a Mulher de Branco
Enquanto os irmãos investigam o desaparecimento de John, um jovem chamado Troy é atacado por uma entidade conhecida como Mulher de Branco. A criatura aparece na estrada, entra no carro dos homens e os conduz até a morte.
Em Jericho, Sam e Dean descobrem que os desaparecimentos podem estar relacionados a uma antiga lenda local. As investigações levam os irmãos até Constance Welch, uma mulher que morreu depois que seus dois filhos se afogaram misteriosamente.
Sam e Dean encontram evidências de que Constance se tornou um espírito vingativo após sua morte. A entidade passou a atacar homens nas estradas, especialmente aqueles que, segundo sua lógica distorcida, eram infiéis às próprias esposas.
Dean é preso enquanto procura o pai
Durante a investigação, Dean e Sam encontram o quarto de hotel onde John esteve hospedado. O local está protegido por um círculo de sal, uma das primeiras demonstrações das regras usadas pelos caçadores de Sobrenatural para lidar com fantasmas.
Dean também é preso após se passar por um agente federal. Na delegacia, o xerife mostra o diário deixado por John e questiona os números anotados nas páginas. Dean percebe que os registros são, na verdade, coordenadas que podem indicar o próximo destino do pai.
Enquanto isso, Sam descobre com Joseph Welch, marido de Constance, detalhes sobre o passado da Mulher de Branco. Ele conclui que o espírito ainda está ligado à antiga casa da família.
Sam enfrenta a Mulher de Branco
Sam segue de carro até a antiga residência dos Welch, mas Constance aparece em seu caminho. Depois de ser atropelada, a entidade surge dentro do veículo e obriga Sam a levá-la para casa.
Quando chegam à antiga propriedade, Sam percebe que Constance não consegue entrar no local. Ele entende que a única maneira de derrotá-la é fazê-la confrontar o próprio passado. Sam conduz o carro para dentro da casa, levando o espírito consigo.
Constance ataca os irmãos e revela sua verdadeira forma monstruosa. Porém, os espíritos de seus dois filhos aparecem. As crianças arrastam a mãe para o além, encerrando a ameaça da Mulher de Branco.
A morte de Jessica muda o destino de Sam no início de Sobrenatural
Depois da investigação, Sam descobre que John está seguindo para Blackwater Ridge. Mesmo assim, decide voltar para Stanford e continuar sua vida ao lado de Jessica.
Ao chegar em casa, porém, Sam percebe que algo está errado. Jessica não aparece, e ele encontra sangue no teto. Em seguida, vê a namorada presa da mesma maneira que Mary Winchester havia sido anos antes.
Jessica é consumida pelas chamas diante de Sam. O acontecimento reproduz a tragédia que marcou sua infância e elimina qualquer possibilidade de retorno à vida normal.
Diante da nova perda, Sam decide permanecer ao lado de Dean. Os irmãos colocam suas coisas no carro e partem para continuar a busca por John. O episódio piloto de Supernatural estabelece, assim, a premissa central da série: Sam e Dean Winchester percorrem os Estados Unidos investigando fenômenos sobrenaturais enquanto procuram pelo pai e tentam descobrir a verdade por trás da morte de suas pessoas mais próximas.